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伊萊博生物科技(上海)有限公司是一家專注于生命科學(xué)領(lǐng)域研究,集生物技術(shù)和產(chǎn)品開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù)、以及科研能力培訓(xùn)服務(wù)為一體的綜合型高科技企業(yè)。
實(shí)時(shí)熒光PCR(real-time PCR),屬于定量PCR(Q-PCR)的一種,以時(shí)間內(nèi)DNA的增幅量為基礎(chǔ)進(jìn)行DNA的定量分析。定量方式包括定量和相對(duì)定量。可檢測(cè)mRNA,microRNA,lncRNA和DNA水平的基因拷貝數(shù)變化。
染色質(zhì)免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation, ChIP)是用于研究體內(nèi)DNA與蛋白質(zhì)相互作用的方法。ChIP不僅可以檢測(cè)體內(nèi)反式因子與DNA的動(dòng)態(tài)作用,還可以用來研究組蛋白的各種共價(jià)修飾與基因表達(dá)的關(guān)系。
DNA片段的克隆需要合適的載體,載體或是質(zhì)粒,或是噬菌體,或是病毒,通常大多經(jīng)過人工改造。作為載體必須具備兩條件:一是該載體在細(xì)胞內(nèi)必須能自主復(fù)制,即必須具備復(fù)制原點(diǎn);二是該載體必須具備適合的酶切位點(diǎn),且這些酶切位點(diǎn)不在復(fù)制原點(diǎn)區(qū)域內(nèi)。以上兩條,保證了載體的可繁殖性和可利用性。為了便于獲得陽(yáng)隆克隆,載體上常有篩選標(biāo)記,如對(duì)抗菌素的抗性,某些基因產(chǎn)物的顯色反應(yīng)等。
DNA甲基化通常抑制基因表達(dá),去甲基化則誘導(dǎo)了基因的重新活化和表達(dá)。這種DNA修飾方式在不改變基因序列前提下實(shí)現(xiàn)對(duì)基因表達(dá)的調(diào)控。
慢病毒(Lentivirus)載體是以HIV-1(人類免疫缺陷I型病毒)為基礎(chǔ)發(fā)展起來的病毒載體。對(duì)分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞均具有感染能力,可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上,從而達(dá)到持久性表達(dá)。在體外實(shí)驗(yàn)及體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的研究中,慢病毒己經(jīng)成為表達(dá)外源基因或外源shRNA的常用載體形式之一, 并且正在獲得越來越廣泛的應(yīng)用。
生物信息學(xué)(Bioinformatics)是在生命科學(xué)的研究中,利用應(yīng)用數(shù)學(xué)、信息學(xué)、統(tǒng)計(jì)學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)為工具對(duì)生物信息進(jìn)行儲(chǔ)存、檢索和分析的科學(xué)。
通過非病毒方法將核酸引入真核細(xì)胞的過程定義為轉(zhuǎn)染。使用各種化學(xué),脂質(zhì)或物理方法,該基因轉(zhuǎn)移技術(shù)是在細(xì)胞背景下研究基因功能和蛋白質(zhì)表達(dá)的有力工具。將外源物質(zhì)導(dǎo)入細(xì)胞的方法主要包括脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染(瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染),電轉(zhuǎn)或者病毒感染。病毒載體是進(jìn)行真核細(xì)胞基因工程、真核基因轉(zhuǎn)染的有力工具。
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